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Biotechnologie Extraction ADN

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Biotechnologie Extraction ADN

Message par Karobio le Jeu 7 Mai 2009 - 19:41

Bonjour Vous

J`ai besoin d`un petit coup de pouce et de vos idées afin de réaliser un projet!
Il faut que j`extrait ADN de Beauvaria Bassiana et si possible avec des billes de silice , mais est ce qu`il y a quelqu`un qui sait comment je pourrais faire.............? Ou trouver un bon protocole?

Merci beaucoup!

Karobio
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Re: Biotechnologie Extraction ADN

Message par Second-Trèfle le Dim 10 Mai 2009 - 20:26

Salut !

Bon, je ne suis qu'en 2nd, mais cette année on a extrait de l'ADN d'oignon et c'était pas mal. Mais, attention, je précise que j'ignore ce qu'est le "beauvaria bassania" et les "billes de silice", mais peut etre que le protocole pourra te donner des idées.

Ingrédients :
-1oignon
-1cc de sel de table
-de l'alcool (à bruler, à 90°, vodka....)
-1à2 gouttes de liquide vaisselle

Matériel :
-1mixer (ou une rape)
-1mini passoire
-1verre gradué
-1filtre à café et un porte filte

Attaquons les choses sérieuses. Déroulement :
1) Placez l'alcool 1/2 heure avant de commencer
2) Epluchez et émincer l'oignon. Réduisez le en purée à l'aide d'un mixer avec le sel
3) Filtrez le jus avec un filtre à café et récupérez le dans un verre
4) Ajoutez-y 1 à 2 gouttes de liquide vaisselle, puis mélangez
5) Versez lentement sur le bord du verre 2 à 3 volumes d'alcool glacé pour un volume de jus d'oignon
6) Laissez reposer qq instants. L'ADN précipite sous forme d'une pelote blanche
7) Vous pouvez l'enrouler sur une fourchette comme des spaghettis et le conserver dans de l'alcool.


Voilà, si tu as des questions, je devrais être en mesure de répondre ^^.

Bonne chance

Second-Trèfle
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Re: Biotechnologie Extraction ADN

Message par falco le Lun 11 Mai 2009 - 17:29

salut,
J'ai tout un protocole extraction AdN qu'on a réalisé sur E.coli K12
MAis on ne part pas d'un principe avec des billes de silice. mais plutôt de solution , avec Lysozyme, SDS EDTA etc...

QUand tu dis " Bille "Silice cela me fait pensé à de la Chromato d'exclusion de taille mais le problème c'est que tu dois brisé les membranes pour pouvoir atteindre l'ADN du champi. donc tu pourais le faire en 2 temps peut-être.

Après je ne peux t'aider d'avantage je pense que tu en sais plus que moi lol
Bon courage

falco
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